Koje su posledice po zdravlje? mRNA vakcine protiv COVID-19 kontaminirane misterioznom DNK i skraćenom mRNK
Savetodavni komitet za praksu imunizacije sastao se prošle nedelje kako bi preporučio ažuriranu vakcinu protiv COVID-19. Međutim, proizvođači su predstavili malo podataka iz testiranja na ljudima. Moderna je bila jedini proizvođač koji je predstavio podatke o bezbednosti i reakciji antitela iz iskustva sa 101 osobom. Pfizer je predstavio podatke o odgovoru antitela na 20 miševa i trenutno prikuplja podatke od 400 pojedinaca u kliničkom testiranju. Tokom sastanka nisu predstavljeni nikakvi podaci o nadzoru proizvodnje.
Kao deo bezbednosne procene odobrenja leka, CMC proces (hemija, proizvodnja i kontrola) postaje kritičan u identifikaciji i eliminaciji nečistoća. Postavlja stroge standarde i specifikacije proizvoda za održavanje čistoće svake serije. Usklađenost sa ovim standardima je od suštinskog značaja za dobijanje odobrenja od globalnih zdravstvenih vlasti.
Zamislite da pijete kafu i odlučite da kupite kesu vrhunske, sveže mlevene kafe iz svoje omiljene prodavnice. Očekujete da svaka kesica sadrži čistu, visokokvalitetnu kafu za pripremu savršene šoljice kafe. Međutim, kada otvorite kesu, otkrivate da to nije samo kafa; sadrži i mešavinu peska i drugih stranih čestica. Ova neočekivana nečistoća potpuno uništava vaše iskustvo.
Baš kao što se oslanjate na čistoću svoje mlevene kafe za odličnu šoljicu kafe, farmaceutska industrija, uključujući proizvodnju vakcina, ima propise koji osiguravaju dobru proizvodnu praksu. Pacijenti i potrošači očekuju da ove smernice znače da formulacije lekova ili vakcina ne sadrže neželjene supstance, obezbeđujući njihovu bezbednost i efikasnost.
Kontrola nečistoća u tradicionalnim hemijskim proizvodima je dobro uspostavljena praksa, ali za biološke proizvode kao što su vakcine zasnovane na mRNK, upravljanje nečistoćama predstavlja jedinstven izazov.
mRNA proizvodi sadrže „fabrike gena“
Dvolančana DNK (dsDNK) se koristi za pravljenje mRNK sadržane u vakcinama protiv COVID-19. Sićušni dsDNK plazmidi su male fabrike gena (slika 1). Ove fabrike proizvode mRNA lance sadržane u LNP. Plazmid izgleda kao mala mikro-narukvica sa različitim segmentima koji predstavljaju različite delove gena.
Regulatorne agencije poput EMA—evropskog regulatornog tela za lekove— postavljaju ograničenja za broj plazmida u konačnim serijama koje se distribuiraju za injekcije. Pokrenuta su nova pitanja o tome kolika je kontaminacija i da li FDA to prati. Takođe je nejasno da li se plazmidi mogu spojiti sa ljudskim genima unutar ćelije ili putovati do creva.
EMA standard za DNK kontaminaciju bočica je 0,33 procenta (330 pg/mg), ili otprilike jedan molekul DNK na svakih 3.000 mRNA molekula. Iako Moderna mRNA-1273 vakcina ispunjava ovaj standard, stvarna zapremina može biti veća zbog loše kontrole kvaliteta. DNK mora biti uklonjena iz konačnog proizvoda pre distribucije, ali se očekuje da će neka zaostala količina ostati. Pitanja bez odgovora uključuju: Koliko je DNK prisutna u bočicama? Da li je to preko granice? Da li FDA prati ovo? A kakve su implikacije, ako ih ima, u pogledu istrajnosti kod primaoca?
Postoje najmanje dve nezavisne grupe istraživača koji su sproveli laboratorijske testove i potvrdili da je mRNA vakcina kompanije Pfizer kontaminirana DNK.
Jedan tim naučnika, na čelu sa mikrobiologom Kevinom Mekkernanom, objavio je preprint dokument koji pokazuje da vakcina Pfizer/BioNTech BNT162b2 ima DNK „redove veličine veće od granice EMA“. Njegov rad još nije recenziran. Ispitane serije, koje je obezbedio anonimni izvor, bile su neotvorene bočice sa isteklim rokom trajanja koje nisu isporučene na suvom ledu. Ako ovi podaci izdrže proveru, stvarna količina plazmida je bila 18 do 70 puta veća od EMA granice. (Tabela 3, strana 12.)
Očigledno je da bi buduća istraživanja trebalo da pokušaju da utvrde nivoe kontaminacije korišćenjem doza koje nisu istekle sa netaknutim hladnim lancem.
Profesor Phillip Buckhaults, koji je doktorirao biohemiju i molekularnu biologiju i koji se smatra stručnjakom za istraživanje genomike raka na Univerzitetu Južne Karoline, izvršio je nezavisnu analizu prisustva DNK u Pfizer serijama.
Bil Gejts ulaže 40 miliona dolara u razvoj mRNA vakcina u Africi https://t.co/GXiQ9u39ra
— Nulta Tačka (@NultaTackaSrb) October 11, 2023
Profesor Buckhaults je u svedočenju izjavio sledeće:
„Pfizer vakcina je kontaminirana plazmidnom DNK. To nije samo mRNA. U njoj su delovi DNK. Ova DNK je DNK vektor koji je korišćen kao šablon za reakciju in vitro transkripcije kada su napravili mRNA. Znam da je ovo tačno jer sam ga sekvencirao u svojoj laboratoriji.
Nastavićemo da pratimo ova istraživanja.
Teoretski rizik od kontaminacije plazmidnom DNK
Iako je posedovanje DNK u uzorku neizbežno i smatra se prihvatljivim, neki su postavili pitanja o mogućnosti genomske integracije DNK. Naše ćelije koriste DNK u jezgru za stvaranje proteina, tako da ako plazmidna DNK uđe u jezgro, postoji teoretski rizik da se može transkribovati i napraviti protein.
Oko 5 do 10 procenata našeg ljudskog genoma sadrži drevnu retrovirusnu DNK. Međutim, ova DNK je mutirana do tačke koja više nije štetna. Svako dalje istraživanje na ovu temu će stoga morati da utvrdi ne samo prisustvo integracije DNK plazmida, već i njegovu biološku aktivnost.
Profesor Buckhaults je dalje komentarisao u svom svedočenju:
„Nekako sam uznemiren zbog mogućih posledica ovoga – i po ljudsko zdravlje i po biologiju – ali bi trebalo da budete uznemireni zbog regulatornog procesa koji je omogućio da to stigne tamo.
Zabrinutost oko migracije DNK u creva
U vezi sa kontaminacijom DNK je zabrinutost zbog rezidualnih vektora ekspresije, ili plazmida, u bočicama. Da bi se napravila milijarda doza mRNA vakcine, potrebno je više od kilograma DNK. Plazmidi pomažu u proizvodnji DNK spajanjem željene sekvence u bakterijski plazmid (slika 1).
Zatim bakterije, često E. coli, pomažu da se dobije DNK za proizvodnju. Ove bakterije imaju dodatni teret: moraju replicirati ne samo svoj genom, već i plazmidnu DNK umetnutu u njihov genom. Ovo zahteva nešto više vremena, tako da će bakterije bez dodatne DNK na kraju nadmašiti one sa DNK.
Da bi rešili ovaj problem, naučnici takođe spajaju gen otpornosti na antibiotike. Čitav skup bakterija se zatim tretira antibiotikom kako bi se ubile bakterije koje se brže repliciraju bez dodeljene otpornosti na antibiotike. Ova selektivna eliminacija omogućava bakterijama otpornim na antibiotike koje nose plazmide da nastave da rastu. Drugim rečima, ovaj gen otpornosti na antibiotike daje prednost koja pokreće pritisak selekcije da favorizuje bakterije koje proizvode željeni DNK.
Međutim, neki naučnici su zabrinuti da bi prekoračenje EMA standarda za kontaminaciju DNK plazmidom moglo uticati na već rastući problem rezistencije na antibiotike. Ovo bi predstavljalo potencijalnu zabrinutost samo ako plazmidi koji sadrže gen otpornosti na antibiotike migriraju u creva, integrišu se sa bakterijskim ciljevima u crevnoj flori i shodno tome poremete mikrobiom creva. Bolesti, uključujući gojaznost, dijabetes, kardiovaskularne poremećaje, rak, hipertenziju i sindrom iritabilnog creva, povezane su sa poremećajima mikrobioma creva.
mRNA kontaminacija
Kontaminacija nukleinskom kiselinom skraćenim mRNA fragmentima je nešto što EMA prati od februara 2021. Na stranici 35 izveštaja o proceni EMA (pdf) o BNT162b2 mRNA vakcini koja je pregledana u prvom delu, EMA navodi: „Skraćena i modifikovana RNK su prisutne kao nečistoće.“ Agencija je navela da su nečistoće pronađene na različitim nivoima tokom proizvodnje. Na primer, nivoi mogu biti viši u manjim testnim serijama nego u većim komercijalnim serijama.
U stvari, danski naučnici, Maks Šmeling, Vibeke Maniše i Peter Ris Hansen, povezali su neželjene događaje sa zapisima o vakcinaciji i otkrili da manje serije BNT162b2 mRNA vakcine mogu imati veću stopu neželjenih događaja (AE). Iako je ovaj nalaz intrigantan, autori pozivaju na dodatna istraživanja kako bi videli da li je ovo dosledan obrazac. Pregledali smo neobrađene podatke koje su dali autori i slažemo se da se čini da postoji grupisanje AE sa serijama koje imaju manje od 100.000 doza.
Već je pokazano in vitro u laboratorijskom eksperimentu da se mRNA može reverzno transkribovati u DNK u roku od šest sati. Ostaje pitanje da li se to može desiti u živom organizmu. Za sada nema dokaza da se proizvod DNK sa reverznom transkripcijom može spojiti sa genomom ljudske ćelije. Tvrdnje o integraciji su isključivo spekulativne i zasnovane na evolucionom presedanu za takav proces.
EMA je tražila dodatno testiranje, ali je dozvolila da se distribucija nastavi. Naučnici su verovali da je malo verovatno da su ovi fragmenti netaknuti fragmenti iRNK. Netaknuti fragment mRNA treba da ima kapu i rep. Kapa i rep su potrebni da kažu ćeliji kada da počne i prestane da proizvodi šiljasti protein.
Ipak, EMA je zatražila dodatne izveštaje. Agencija je bila zabrinuta da bi se autoimuna reakcija mogla pokrenuti ako potencijalno kodirani proteini fragmenata liče na ljudske proteine. Drugim rečima, ako fragmenti „imitiraju“ ljudske proteine, antitela bi se mogla razviti protiv naših tela.
„Svaka homologija između prevedenih proteina (osim predviđenog proteina šiljaka) i humanih proteina koji mogu, zbog molekularne mimikrije, potencijalno izazvati autoimuni proces, treba da se proceni. Rok: jul 2021. Privremeni izveštaji: mart 2021, i na mesečnom osnovu“, navela je EMA.
Jasno je da masovna proizvodnja mRNK u industrijskom obimu nosi potencijalne rizike. Ovo pitanje su nedavno pokrenuli drugi istraživači ukazujući na ulogu kontrole kvaliteta proizvodnje. Na primer, The Epoch Times je ranije istraživao vezu između problema kvaliteta i rizika od zgrušavanja (Deo 1, Deo 2 i Deo 4).
Ovo pitanje kontaminacije fragmentima DNK i mRNA takođe treba dalje istražiti da bi se razumelo da li su određene partije bile pogođene više od drugih. Takođe moramo da znamo da li je kontaminacija DNK povezana sa neželjenim događajima. EMA bi trebalo striktno da poštuje svoje standarde praćenja.
Pitanje bilo kakve kontaminacije DNK je biološki neizbežno s obzirom na to da je mRNA transkribovana iz DNK vektora. Potencijalni problem ovde je neobično visok nivo kontaminacije DNK uključen u mRNA vakcine.
Međutim, okretanje ovih RNK terapeutika na platformu za vakcinu u kontekstu zaostalog regulatornog okvira ostavilo nam je mnogo pitanja bez odgovora. Zvaničnici javnog zdravlja su, međutim, bili nepokolebljivi da bi ovaj novi proizvod trebalo da se primeni na način koji odgovara svima, ignorišući različite profile rizika od COVID-19 u širokoj populaciji. Ovo, zauzvrat, verujemo da je postavilo scenu za prekoračenje politike koje rezultira neetičkim i štetnim nalozima za vakcinaciju i druge mere.
Reference:
https://doi.org/10.1093/cid/ciab465
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/35723296/
http://dx.doi.org/10.15585/mmwr.mm7002e1
https://www.nejm.org/doi/full/10.1056/NEJMoa2028436
https://stacks.cdc.gov/view/cdc/97349
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8084611/#bib0043
https://doi.org/10.1126/sciadv.abl8213
https://doi.org/10.3390/ijms23136940
https://doi.org/10.1038/s41434-020-00204-y
https://doi.org/10.1208/s12249-015-0394-x
https://www.thelancet.com/journals/eclinm/article/PIIS2589-5370(22)00234-6/fulltext
https://jamanetwork.com/journals/jamanetworkopen/fullarticle/2793348
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S165838761150038X
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/36588456/
https://doi.org/10.1186/s13054-020-03304-8
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/31655206/
https://www.fda.gov/media/158178/download
https://www.fda.gov/media/139638/download
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC9313234/
https://doi.org/10.1042/BSR20210611
https://doi.org/10.1038/s41578-021-00358-0
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2772829322000200
https://www.nature.com/articles/s41578-021-00281-4
https://doi.org/10.1038/s41541-023-00661-7
https://doi.org/10.1038/s41467-019-08333-8
https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2022.04.011
https://www.audible.com/pd/Jessica-Rose-PhD-VAERS-Data-And-Truth-Podcast/B09YMLJGBN?clientContext=132-5166709-6339436&loginAttempt=true&noChallengeShown=true
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7564888/
https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fimmu.2022.827146/full
https://doi.org/10.1038/s41392-022-01007-w
https://jamanetwork.com/journals/jamaotolaryngolog
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/33328624/
https://www.cell.com/cell/fulltext/S0092-8674(22)00076-9
https://doi.org/10.1016/S1473-3099(22)00054-8
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8723777/
https://www.cell.com/trends/molecular-medicine/fulltext/S1471-4914(22)00103-4
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC8957368/
https://www.ahajournals.org/doi/10.1161/CIRCULATIONAHA.122.061025
